高考第一轮复习第35讲 微生物的培养与应用


考点一 培养基及微生物的纯化培养技术固必备知识提关键能力


固必备知识


目录4一、培养基1.概念：人们按照微生物对①___________的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。营养物质2.营养组成：一般都含有②_________________和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对 、氧气以及③_______________的要求。 水、碳源、氮源特殊营养物质


目录53.微生物的营养物质及其作用营养要素作用主要来源碳源构成生物体细胞的物质和一些代谢产物;既是碳源又是能源物质（有机碳）无机碳源： 、 等有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等氮源合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物无机氮源： 、 、铵盐、硝酸盐等有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素等营养要素作用主要来源碳源构成生物体细胞的物质和一些代谢产物;既是碳源又是能源物质（有机碳）氮源合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物


目录6营养要素作用主要来源水良好的溶剂,维持生物大分子结构的稳定,作为溶剂和运输的介质,参与生化反应培养基、大气、代谢产物等无机盐构成细胞成分,作为酶的组成成分,调节培养基的渗透压、 等培养基特殊营养物质生长必不可少的微量有机物酵母膏、水解酪素等说明微生物最常利用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;常利用的无机氮源是铵盐和硝酸盐;对异养微生物来说,含 、 、 、 的化合物既是碳源,又是氮源和能源物质营养要素作用主要来源水良好的溶剂,维持生物大分子结构的稳定,作为溶剂和运输的介质,参与生化反应培养基、大气、代谢产物等无机盐培养基特殊营养物质生长必不可少的微量有机物酵母膏、水解酪素等说明续表


目录74.种类（1）按照物理性质分:液体培养基、固体培养基、半固体培养基。（2）按照成分来源分:天然培养基和合成培养基。（3）按照功能用途分:选择培养基、鉴别培养基等。类型实例选择培养基培养基中加入青霉素,分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离消除污染石油的微生物的目的


目录8类型实例选择培养基将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物鉴别培养基伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌（菌落呈黑色）续表


目录9二、无菌技术常用方法高压蒸汽


目录10三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→称量→溶化→灭菌→⑤_________。倒平板


种环
集的菌种
逐步稀释分散面培养基的表到。（1）操作第一
步（即取菌种之前）及每次划线之前都需要将接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结
束时,仍需灼烧接种环。接
目录11四、纯化大肠杆菌的方法1.平板划线法：通过⑥________在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚


的目的
次操作每次
划线之前划线结束目的杀死接
种环一次划线后接种环上残留的菌种,使下一种环上残存的菌种,避免
上原有的微生物杀死上次划线的菌种直接来源于上一次划线的末端,使细菌污染环境和
每次划线菌种的数目减少杀死接感染操作者（2）
灼烧接种环,后应待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。每次灼烧
目录12第一


一次划线末端单个
次及其以后的划线操作总是使细菌的_________________从⑦,开始数目随着
细菌繁而来梯
划线次数的增加而逐渐减少,最终得到_________________⑧由的菌落。2.稀释涂布
度稀释
平板法：将菌液进行一系列的然_______⑨___,_后将不同稀释度的菌液分别
涂布面琼脂固体培养基的表到,进行培养。上
目录13（3） 第二


稀释涂布平板法的比较比较项
目平板划线法稀释涂布布涂释法线划板平稀目 关键操作接 示图 法板平平板法图示 关键操作接
种环在固体培养基表面连续划线 .一种环在固体培养基表面连续划线注意事项每次
系列的梯度涂布; 稀释.平板法操作注意事项每次
度要足够高,为为,度要足够高确保确保实实验验增成功可以成功可以增
划线划线前后均前后均需需灼烧接灼烧接稀释种环种环稀释
加加稀释稀释度的度的比较项范围范围
目录143.平板划线法和


布平板划线法稀释涂目平板法菌体
具有所需显著菌落特征的区域菌落中
获取在的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优
挑取菌体从适宜
根据菌落的特点获得某种微生物的获得单细胞菌落,又能对微生物进行
点可以
单细胞菌落既可以计数缺
点不能对微生物进行计数操作复杂,需要涂布多个平板续表
目录15比较项


、菌种的保存方法1.对于
频繁使用的菌种,可以采用临时m 的方法。 2.对于需要长
油管藏
期保存的菌种,可以采用__⑩_________的方法。甘
目录16五


表是某方微生物培养基的配种表,回答下列问题 牛肉膏蛋白胨 琼脂水 ： 牛肉膏蛋白胨琼脂水（1） 此培养基的营养成分有
五中,其类蛋白胨提供的营养物质是______________________。碳源、氮源、维生素[解
析] 稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计落,数般选择菌一数在30~300的平板
在培养基制备过 ）2（ 。行进计数。样品每克中的菌落数个为 >m  
目录17下


本无要求是的菌操作。液体培养基应选用的灭菌方法是____________________（
灭菌法会使培养基中的水分蒸
填“高压蒸汽灭菌法”或“干热灭法菌”）,不选另外一种的原因______是_________________________________;与
发达到消
煮沸消毒法氏比,巴相毒消较的目的损失同时营养物质,毒的法优_________________________________________。（4） _用______是点
少  
稀释涂布平板法统计菌落数目时,最好选择菌落数在___________的平板进行
计数。若统计出在稀释倍数的平板 为上的平均菌落数所为30个,用稀释液的体积为则每克样品 ,
中的细菌数____为_______个。 高压蒸汽灭菌法干热
目录18（3） 微生物培养最基


种环①接
株时,通常使用的划线工具是_________。划线的某个平板培养后,第一划线
域区的划线上不都地间断长满了菌落,第二划线区域的第一条线上,无菌落其他划线
种环灼烧后未冷却;②划线未从第一
上有菌落。造线成划无菌落可能的操作失误__：_______________有__________________________________。接
区域末端开始
目录19（5） 纯化菌


关键能力


向1 培养基及无菌操作 (2021·成都
模拟)锦江是成都市的母亲河,千百年它来,环抱成都这座古城穿、流闹市,孕育了璀璨
的古蜀文化,滋养着蓉城大地。某研究性学习小组为了调查锦江府南河段
的水质状况,测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌鉴别、分离与纯化等
工作。回答下列问题：
目录21考


成组员划计采用布稀释涂平板法检测水样细中菌含量。在制备平板时,需要进行
培养基中所孢的微生物,包有芽括与孢子①③④①②④⑥
高压蒸汽灭菌,其目的是________________________________在_________。_样品稀释
与布涂过平板的程,中需要使用的实验仪器_别有___分_____和____（_______请填写对应
数字。①）酒精灯 ②
装有培养基的培养皿 ③试管 ④移液管（带刻度的滴管） ⑤接
⑥种环⑦显涂布器 微镜杀死
目录22（1） 该小


组经培养发现即使在最低稀释度下培养得到的菌落数仍然极少,有的为 0,有的
仅有一两个,推测可能原因是：①府南河段水质较水体细菌,好密度本来就低;
灭菌后未冷却,杀死大多数菌种滤膜
②____________________________________。为
了验证上述假说①是否成立,研究小组决定检测锦江府南河段的水质,他们选取的检测指标
法伊红美蓝
是单位体积河菌水中大肠杆数量,则研小究可以组采法。其用_________具体操作是将
已知体积的水过将滤,滤膜放在___________培养基上培养一段时统间后,计黑色菌落
数目,将菌落数目除以水样体积,算出单位体积水样中大肠杆菌数量。涂布器
目录23（2） 研究小


在《生饮活水用卫生》准标中规定,饮用自来水中不得检出总大肠菌群、耐热
肠菌大群大、肠埃希氏菌,但研究小组从府河南水段中检出了较低比的例大肠杆菌,表明
锦江河水还未达到饮用水得标,不准直接饮用。为进一步进行研究,该小组成员将得菌的大肠杆菌到
株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡
培养。结果发现：振荡菌养培细的比静置培养的细菌生长速度更快,分析其量养能,培含氧的解中溶液培养高提同时可使菌体与培养液因原__________________________________________________________________________。_解_____________是[
充分接触,提高营养物质的利用率
析] 振荡培养比静置培养的细菌生长速度快,由此可以说明该细菌是需氧菌。由于
振荡液养提高培养液中溶解氧的含量,同时可培体与培养使菌充分接触,提高营养物质的利用
率。振荡故生长培养的细菌速度更快。振荡
目录24（3） 我国


模拟)为了调查某湖泊的水质某学状,况习小组测定了该湖泊
水样量的细菌含中,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：（1） 该小
组采用稀释��